Enfermedades de madera de viña : identificación, patogenicidad y control biológico de los hongos causantes del decaimiento por Botryosphaeria
DATE:
2019-04-12
UNIVERSAL IDENTIFIER: http://hdl.handle.net/11093/1231
SUPERVISED BY: Mansilla Vázquez, J. Pedro
DOCUMENT TYPE: doctoralThesis
ABSTRACT
Las enfermedades de madera de viña (EMVs) son uno de los problemas
fitosanitarios más relevantes que afectan al viñedo en la actualidad y, por tanto,
algunos autores las consideran coma la filoxera del siglo XXI. Este síndrome
integra a un total de 7 patologías que incluye a más de 133 especies de hongos.
Los registros de muestras de viñas adultas de la provincia de Pontevedra recibidas
en el laboratorio de la Estación Fitopatolóxica Areeiro evidencian el mal estado
fitosanitario del viñedo gallego donde el decaimiento por Botryosphaeria es la
enfermedad que más afecta a este cultivo seguido de la yesca y el decaimiento por
Diaporthe. Además, el aislamiento de especies fúngicas causantes de 2 o más
patologías por muestra, fue aumentando a lo largo de los años, lo que complica la
búsqueda de un método de control efectivo, ya que éste tiene que ser capaz de
controlar a hongos de muy diversa naturaleza. Una de las principales causas del
aumento en la incidencia de estas patologías es el mal estado fitosanitario de las
plantas producidas en vivero. El estudio pormenorizado de las plantas de la
variedad Albariño e injertadas sobre Richter 110 y 196-17 Castel mostró que la
incidencia de EMVs fue muy elevada entre el 80-100% de las plantas analizadas.
Las patologías que se detectaron con mayor frecuencia fueron las causantes del
pie negro y los decaimientos por Botryosphaeria y Diaporthe. El decaimiento por
Botryosphaeria está causado por los hongos de la familia Botryosphaeriaceae,
patógenos de madera conocidos, de naturaleza polífaga y distribución
cosmopolita. En viña, se incluyen 8 géneros patógenos con casi 50 especies
implicadas. Los avances de las técnicas moleculares permitieron diferenciar
especies crípticas dentro de los géneros Neofusicoccum y Lasiodiplodia que serían
difícilmente identificables por los métodos convencionales de morfología. Los
análisis moleculares en combinación de los morfológicos identificaron un total de
12 especies donde Neofusicoccum parvum, Botryosphaeria dothidea, Diplodia
seriata y D. mutila fueron las más frecuentes. La virulencia de estas especies junto
con D. corticola, N. australe, N. luteum y N. mediterraneum fue testada en
sarmientos y plantas de vid Albariño y los resultados mostraron que las especies
del género Neofusicoccum fueron las más virulentas detectándose variabilidad
intra e interespecífica. No se conoce, en la actualidad, un producto capaz de
controlar a estos patógenos, por lo que la búsqueda de un método eficaz y
respetuoso con el medio ambiente es una línea de investigación prioritaria en la lucha contra las EMVs. Los hongos del género Trichoderma son endófitos o
saprófitos con capacidad antagonista y que pueden ser usados como método de
biocontrol. Catorce cepas obtenidas de muestras vegetales junto a 2 cepas de una
colección y 2 productos comerciales de 7 especies diferentes fueron evaluadas in
vitro frente a N. parvum. La cepa Trichoderma atroviride MUCL 45632 presentó
uno de los mayores índices de antagonismo y se seleccionó para la realización de
ensayos en sarmientos y plantas de vid con las 5 especies de la familia
Botryosphaeriaceae que en los ensayos previos de patogenicidad demostraron ser
más agresivas (D. corticola, N. australe, N. luteum, N. mediterraneum y N.
parvum). Los resultados de los ensayos de biocontrol en planta fueron muy
positivos: tanto las lesiones producidas por el avance de los patógenos como el
reaislamiento de los mismos fueron reducidos por la aplicación de T. atroviride,
siendo el efecto mayor cuando este se aplicó antes que el patógeno, de forma
preventiva. As enfermidades de madeira da vide (EMVs) son uns dos problemas fitosanitarios
mais relevantes que afectan ao viñedo na actualidade e, por ende, algúns autores
considéranas coma a filoxera do século XXI. Este síndrome integra a un total de 7
patoloxías que inclúe a mais de 133 especies de fungos. Os rexistros de mostras
de vides adultas da provincia de Pontevedra recibidas no laboratorio da Estación
Fitopatolóxica Areeiro evidencian o mal estado fitosanitario do viñedo galego onde
o decaemento por Botryosphaeria é a enfermidade que mais afecta ás vides
seguido da esca e o decaemento por Diaporthe. Ademais, o illamento de especies
fúnxicas causantes de 2 ou mais patoloxías por mostra, viu aumentando ao longo
dos anos, o que complica a busca dun método de control efectivo, xa que este ten
que ser eficaz con fungos de moi diversa natureza. Unha das principais causas do
aumento na incidencia destas patoloxías é o mal estado fitosanitario das plantas
producidas en viveiro. O estudo pormenorizado das plantas da variedade Albariño
e inxertadas sobre Richter 110 e 196-17 Castel mostrou que a incidencia de EMVs foi moi elevada entre o 80-100% das plantas. As patoloxías que se detectaron con
maior frecuencia foron as causantes do pe negro e os decaementos por
Botryosphaeria e Diaporthe. O decaemento por Botryosphaeria está causado por
os fungos da familia Botryosphaeriaceae, patóxenos de madeira coñecidos, de
natureza polífaga e distribución cosmopolita. En viña inclúense 8 xéneros
patóxenos con case 50 especies implicadas. Os avances das técnicas moleculares
permitiron diferenciar especies crípticas dentro dos xéneros Neofusicoccum e
Lasiodiplodia que serían dificilmente identificables polos métodos convencionais
de morfoloxía. As análises moleculares en combinación dos morfolóxicos
identificaron un total de 12 especies das que Neofusicoccum parvum,
Botryosphaeria dothidea, Diplodia seriata e D. mutila foron as mais frecuentes. A
virulencia destas especies xunto con D. corticola, N. australe, N. luteum e N.
mediterraneum foi testada en sarmientos e plantas de vide Albariño e os
resultados mostraron que as especies do xénero Neofusicoccum foron as mais
virulentas detectándose variabilidade intra e interespecífica. Non se coñece, na
actualidade, un produto capaz de controlar a estes patóxenos, polo que a busca
dun método eficaz e respectuoso co medio ambiente é unha liña de investigación
prioritaria na loita contra as EMVs. Os fungos do xénero Trichoderma son
endófitos ou saprófitos con capacidade antagonista e que poden ser usados como
método de biocontrol. Catorce cepas obtidas de mostras vexetais xunto a 2 cepas
dunha colección e 2 produtos comerciais de 7 especies diferentes, foron avaliados
in vitro fronte a N. parvum. A cepa Trichoderma atroviride MUCL 45632 presentou
un dos maiores índices de antagonismo e se seleccionou para a realización de
ensaios en sarmientos e plantas de vide con as 5 especies da familia
Botryosphaeriaceae que nos ensaios de patoxenicidade previos foron mais
agresivas (D. corticola, N. australe, N. luteum, N. mediterraneum y N. parvum). Os
resultados dos ensaios de biocontrol en planta foron moi positivos: tanto as
lesións producidas polo avance dos patóxenos coma o reillamento dos mesmos
foron reducidos pola aplicación de T. atroviride, sendo o efecto maior cando este
se aplicou antes que o patóxeno, de forma preventiva. Grapevine trunk diseases (GTDs) are one of the most important phytosanitary
problems that affect the vineyard at the present time and, for this reason, they are
considered as the phylloxera of the 21st century. This syndrome integrates 7
pathologies that include more than 133 species of fungi. The records of adult vine
samples from the province of Pontevedra received in the laboratory of the
“Estación Fitopatolóxica Areeiro” evidence the poor phytosanitary status of the
Galician vineyards where Botryosphaeria dieback is the disease that most affects
the vineyards followed by esca and Diaporthe dieback. In addition, the isolation of
fungal species causing 2 or more pathologies per sample has been increasing over
the years, which complicates the search of an effective control method, because
this last one has to be effective with fungi of very diverse nature. One of the main
causes of the incident increase of these pathologies is the poor phytosanitary
status of the plants produced in nurseries. The detailed study of the Albariño plants
grafted onto Richter 110 and 196-17 Castel rootstocks showed that the incidence of
GTDs was very high among 80-100% of the analyzed plants. The pathologies that
were most frequently detected were those causing black foot disease,
Botryosphaeria dieback and Diaporthe dieback. Botryosphaeria dieback is caused
by fungi of the Botryosphaeriaceae family, which are known wood pathogens,
polyphagous and cosmopolitan species. Eight pathogenic genera with almost 50
species have been detected in grapevine. Advances in molecular techniques have
allowed to differentiate cryptic species within the genera Neofusicoccum and
Lasiodiplodia, which would be difficult to identify by morphological conventional
methods. Molecular analyses in combination with morphological ones, identified
a total of 12 species of which Neofusicoccum parvum, Botryosphaeria dothidea,
Diplodia seriata and D. mutila were the most frequent. The virulence of these
species and D. corticola, N. australe, N. luteum and N. mediterraneum was tested
on Albariño shoots and grapevine plants and the results showed that the species
of the genus Neofusicoccum were the most virulent, detecting intra and
interspecific variability. Nowadays there is no effective product able to control
these pathogens, so the search of an effective and environmentally friendly
method is a priority research line in the fight against GTDs. The fungi of the genus
Trichoderma are endophytes or saprophytes with antagonistic capacity and can be used like a biocontrol method. Fourteen strains obtained from plant samples, 2
strains from a private collection and 2 commercial products of 7 different species,
were evaluated in vitro against N. parvum. The strainTrichoderma atroviride MUCL
45632 presented one of the highest antagonism indexes and it was selected to carry
out tests on vine shoots and plants with the 5 species of the Botryosphaeriaceae
family that in the previous pathogenicity tests proved to be more aggressive (D.
corticola, N. australe, N. luteum, N. mediterraneum and N. parvum). The results of
the plant biocontrol tests were very positive: both, the injuries produced by the
progress of the pathogens and their reisolation were reduced by the application of
T. atroviride, and the effect was greater when it was applied before the pathogen,
as a preventive method.