Desarrollo de ensayos alternativos a los físico-químicos para la confirmación de biotoxinas marinas presentes en alimentos de origen marino.

Abstract

En el ámbito de las biotoxinas marinas se han desarrollado una gran variedad de metodologías que están basadas en la utilización de ensayos alternativos a los métodos físico-químicos, entre los que destacamos los ensayos celulares, ensayos enzimáticos, ensayos inmunológicos o biosensores, entre otros. Así, la presente tesis mostrará un detallado trabajo experimental que incluye, tanto el desarrollo, como la evaluación de la aplicabilidad de dichos ensayos para establecer la eficacia de los mismos sobre los diferentes grupos de biotoxinas marinas, mostrando un énfasis especial sobre las toxinas emergentes en la UE. La evaluación de esos ensayos se hará siempre en base a la confirmación de los resultados obtenidos mediante cromatografía de líquido acoplada a la espectrometría de masas en tándem (HPLC-MS/MS). Asimismo, las conclusiones extraídas a partir de los datos resultantes podrán ser utilizadas, tanto para el desarrollo como para la optimización de métodos que nos permitan monitorizar, identificar, detectar y cuantificar familias objetivo de toxinas.

Na actualidade desenvolvéronse, no ámbito das biotoxinas mariñas, unha gran variedade de metodoloxías baseadas na utilización de ensaios alternativos ós métodos físico-químicos, entre os que podemos destacar os ensaios celulares, ensaios enzimáticos, inmunoensaios e biosensores entre outros. Nesta tese mostrarase un traballo experimental detaiado, no que se inclúe tanto o desenrolo como a avaliación da aplicabilidade de ditos ensaios para establecer a eficacia dos mesmos sobre os diferentes grupos de toxinas mariñas, cunha énfase especial sobre as toxinas emerxentes na UE. A avaliación dos ensaios farase sempre en base á confirmación dos resultados obtidos mediante cromatografía de líquido acoplada a espectrometría de masas en tándem (HPLC-MS/MS). Ademais, as conclusións extraídas dos datos resultantes poderán ser usados tanto para desenvolver como para optimizar ensaios que nos permitan monitorizar, identificar, detectar e cuantificar familias obxectivo de toxinas.

Currently, a broad range of methodologies based on the use of alternative assays to instrumental methods have been developed for the screening and quantification of marine biotoxins because providing toxicological information but also low cost, simplicity and high-throughput analysis. Inmunoassays, cell-based assays, receptor binding assays and biosensors, among others, stand out the most promising alternative methods. The aim of the present thesis includes development as well as evaluation of the applicability of this methods in order to establishing its effectiveness on different groups of marine toxins, paying particular interest on emerging toxins in UE. Analytical method based on high performance liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry (HPLC - MS/MS) will allow to confirm the results given by alternative assays. Resulting data are a guide both towards development and improvement of specific methods for monitoring include identification, detection and quantification target families of toxins.